(資料圖片僅供參考)
1、LB培養(yǎng)基是一種培養(yǎng)基的名稱,生化分子實(shí)驗(yàn)中一般用該培養(yǎng)基來預(yù)培養(yǎng)菌種,使菌種成倍擴(kuò)增,達(dá)到使用要求.可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。
2、液態(tài)培養(yǎng)基根據(jù)《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》(J.薩姆布魯克D.W.拉塞爾著)配制每升培養(yǎng)基,應(yīng)該在950 ml去離子水中加入:胰蛋白胨10g酵母提取物5gNaCl 10g搖動(dòng)容器直至溶質(zhì)溶解.用5mol/LNaOH調(diào)pH至7.0.用去離子水定容至1L.在15psi高壓下蒸汽滅菌21min.培養(yǎng)的菌種一般是經(jīng)過改造的無法在外界環(huán)境單獨(dú)存活和擴(kuò)增的工程菌.通過培養(yǎng)工程菌,我們可以表達(dá)大量的外源蛋白,也可以拿到帶有外源基因的質(zhì)粒,工程菌的有效擴(kuò)增是生化分子實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)。
3、LB培養(yǎng)基的配方如下:胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L酵母提取物(Yeast extract) 5g/L氯化鈉(NaCl) 10g/L另外根據(jù)經(jīng)驗(yàn)值用NaOH調(diào)節(jié)該培養(yǎng)基的pH,使其達(dá)到7.4(該pH適合目前使用最廣的原核表達(dá)菌種E.coli的生長)固態(tài)培養(yǎng)基LB固體培養(yǎng)基1L和液體一樣,加15g~20g瓊脂粉,一定要在溫度降下之前加好抗生素,并且倒好板。
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